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A549細胞來源

A549細胞又稱為肺癌人類肺泡基底上皮細胞，最早是在1972年由D.J.Giard等人通過一位58歲的白人男性的外植體腫瘤，轉(zhuǎn)移并培養(yǎng)肺腫瘤組織而得到的。

       在自然界中，這些細胞是鱗狀的，它們可以通過肺泡擴散傳播一些物質(zhì)，如水和電解質(zhì)。如果將A549細胞體外培養(yǎng)，它們會成長為單層細胞，附著或緊貼在培養(yǎng)瓶上。人肺泡上皮細胞株A549可以固定或懸掛在體外的溶液。

A549細胞培養(yǎng)體系

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A549細胞特點

     部分細胞傳代后細胞內(nèi)出現(xiàn)黑色小點，細胞間隙內(nèi)出現(xiàn)少量顆粒物或者培養(yǎng)基中浮游著少量死細胞等均為正常現(xiàn)象，對細胞的增殖及試驗無影響。

細胞消化或者復(fù)蘇操作不當(dāng)容易導(dǎo)致細胞死亡裂解產(chǎn)生大量碎片及顆粒，進而影響活細胞狀態(tài)，注意消化或復(fù)蘇過程盡量輕柔，嚴格控制消化時間和復(fù)蘇操作規(guī)范，傳代或復(fù)蘇24h后建議觀察細胞，建議換液一次去除死亡細胞；

A549細胞常見問題處理

Q: 培養(yǎng)過程中出前黑點問題如何處理？

A: 細胞內(nèi)的黑色顆粒是細胞外分泌泡及細胞器折光，這個屬于細胞自身特性，無法清除也無法改變，大部分細胞都會有這種現(xiàn)象，只是不同細胞顆粒多少有區(qū)別，細胞培養(yǎng)體系不適應(yīng)、營養(yǎng)缺乏、滲透壓異常等均可能導(dǎo)致細胞內(nèi)顆粒增加，建議使用合適的培養(yǎng)條件。

細胞外的黑色顆粒大部分是細胞碎片和細胞代謝產(chǎn)物，可以先吸走培養(yǎng)基后用PBS潤洗清除，再加新的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。潤洗不能清除的可以換液清洗后等細胞密度70-80%左右消化處理細胞，消化完成后加完全培養(yǎng)基終止消化，混勻細胞，收集細胞懸液900-1000rpm(約150g)離心3min，棄上清。再加5ml PBS重懸細胞，再離心后，用完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次。

Q: A549細胞最佳消化時間建議多久

A： 每個客戶用的胰酶活力及消化步驟、試劑都是不一樣的，不能完全規(guī)定消化時間，以實際消化效果和客戶經(jīng)驗為準。

Q:  A549 細胞倍增時間多久？

A: 該細胞倍增時間較短，生長速度快，注意控制傳代密度，建議1:3-1:4。