文章分類
什么是細(xì)胞分化,首先來段名詞解釋,細(xì)胞分化的概念:在個(gè)體發(fā)育中,由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代,在形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性的差異的過程稱為細(xì)胞分化(cellulardifferentiation)。細(xì)胞分化是一種持久性的變化,細(xì)胞分化不僅發(fā)生在胚胎發(fā)育中,而是在一生都進(jìn)行著,以補(bǔ)充衰老和死亡的細(xì)胞.如:多能造血干細(xì)胞分化為不同血細(xì)胞的細(xì)胞分化過程。一般來說,分化了的細(xì)胞將一直保持分化后的狀態(tài),直到死亡。
細(xì)胞分化實(shí)例
PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞,是從可移植的大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤中建立的細(xì)胞系。主要用于神經(jīng)發(fā)育、神經(jīng)藥理學(xué)和神經(jīng)毒理學(xué)等領(lǐng)域的研究。表達(dá)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)受體。NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型,不合成腎上腺素。
PC-12細(xì)胞主要分為未分化、低分化、高分化三種類型,有典型分化鏡下圖狀態(tài)。
圖 1pc12未分化狀態(tài)
圖 2pc12低分化狀態(tài)
圖 3pc12高分化狀態(tài)
從PC12細(xì)胞未分化、低分化、高分化三種類型的鏡下圖可以看出來伴隨分化的嚴(yán)重細(xì)胞形態(tài)會(huì)發(fā)生較大的改變,從一開始的圓形到少量突觸再到高分化的嚴(yán)重絲狀觸角。這個(gè)是分化最明顯肉眼觀察得到的指征。
分化的本質(zhì)
細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。
不同的組織都是由特殊類型的細(xì)胞組成的。每種細(xì)胞類型不但外形迥然不同,所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)也大有差別。由于基因控制著蛋白質(zhì)的產(chǎn)生,而對(duì)于每個(gè)生物的每個(gè)細(xì)胞來講應(yīng)該含有一套完全相同的基因。那么為什么不同的組織會(huì)產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)呢?
這是因?yàn)殡m然每個(gè)生物的所有細(xì)胞都含有同樣的全套基因,但各個(gè)基因的表達(dá)有差別。當(dāng)細(xì)胞開始分化時(shí),不同細(xì)胞的不同基因會(huì)在不同時(shí)間內(nèi)被激活,表達(dá)一段時(shí)間后,一批基因的活動(dòng)可能停止而另一批基因還在繼續(xù),從而產(chǎn)生了各自細(xì)胞特定的蛋白質(zhì),進(jìn)而產(chǎn)生了不同的組織。因此,雖然所有的細(xì)胞都具有同樣的遺傳信息,但由于不同的基因在表達(dá),才有不同的分化。當(dāng)然哪些基因表達(dá)且何時(shí)表達(dá),取決于基因的選擇性,細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)沒有變化。個(gè)體絕不是細(xì)胞的簡(jiǎn)單堆疊,而在于細(xì)胞的分化。所以說,細(xì)胞分化是個(gè)體發(fā)育的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。
為什么體外細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞分化能力減弱
細(xì)胞離體后,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響,生活在缺乏動(dòng)態(tài)平衡的相對(duì)穩(wěn)定環(huán)境中,日久天長(zhǎng),會(huì)出現(xiàn)分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無限生長(zhǎng)的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系的現(xiàn)象。因此,培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。
體外培養(yǎng)的細(xì)胞分化能力并未完全喪失,只是環(huán)境的政變,細(xì)胞分化的表現(xiàn)和在體內(nèi)不同。細(xì)胞是否表現(xiàn)分化關(guān)鍵在于是否存在使細(xì)胞分化的條件,如 Friend細(xì)胞(小鼠紅白血病細(xì)胞)在一定的因素作用下可以合成血紅蛋白,血管內(nèi)皮細(xì)胞在類似基膜物質(zhì)底物上培養(yǎng)時(shí)能長(zhǎng)成血管狀結(jié)構(gòu),雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特異的單克隆抗體,這些均屬于細(xì)胞分化行為。
發(fā)生細(xì)胞分化應(yīng)該如何處理
細(xì)胞分化具有以下特點(diǎn):
1、持久性:細(xì)胞分化貫穿于生物體整個(gè)生命進(jìn)程中,在胚胎時(shí)期達(dá)到最大限度。
2、穩(wěn)定性:通常來說,分化了的細(xì)胞將一直保持分化后的狀態(tài),直至死亡。
3、普遍性:是生物界普遍存在的生命現(xiàn)象,是生物個(gè)體發(fā)育的基礎(chǔ)。
4、不可逆性:細(xì)胞只能從全能干細(xì)胞最終走向高度分化的體細(xì)胞,不能反向進(jìn)行(即全能性逐漸減小)。
所以在細(xì)胞培養(yǎng)中我們只能依靠預(yù)防分化的措施避免分化的產(chǎn)生:
1、控制細(xì)胞密度,凍存時(shí)密度在1*106左右,培養(yǎng)時(shí)根據(jù)不同細(xì)胞的生長(zhǎng)習(xí)慣,細(xì)胞密度不能過高或者過低。
2、控制消化時(shí)間,細(xì)胞一般對(duì)胰酶比較敏感,貼壁細(xì)胞在消化時(shí)需要注意使用的胰酶品牌、胰酶量、消化時(shí)間等細(xì)節(jié)。
3、更換優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)體系,營(yíng)養(yǎng)成分改變或者營(yíng)養(yǎng)成分過低可能會(huì)引起細(xì)胞分化產(chǎn)生。
4、控制培養(yǎng)時(shí)間,細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間在一個(gè)空間生長(zhǎng)不增殖也會(huì)導(dǎo)致分化產(chǎn)生,需要定期觀察,做換液重鋪操作?;蛘咴黾訝I(yíng)養(yǎng)成分促進(jìn)細(xì)胞增值。